多糖多酚植物葉片直接PCR試劑盒-防PCR產(chǎn)物污染體系

 產(chǎn)品簡(jiǎn)介

直接使用多糖多酚植物葉片裂解液作為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，無(wú)需單獨(dú)抽提DNA，快速，靈敏度高，適合快速大規(guī)?；驒z測(cè)。

增加了UNG防污染體系，杜絕假陽(yáng)性；試劑盒包含裂解液/PCR Mix

產(chǎn)品特點(diǎn)

無(wú)需進(jìn)行費(fèi)時(shí)而昂貴的DNA純化。

樣品需求量小，直徑2mm(1mg)的葉片即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

無(wú)需研磨、破碎葉片等特殊處理，操作簡(jiǎn)便。

優(yōu)化的PCR體系，使PCR具有更高的特異性、更強(qiáng)的PCR反應(yīng)抑制物耐受性。

防污染PCR體系2× Leaf PCR EasyTM Mix(UNG)，有效消除由PCR產(chǎn)物所引起的污染，保證擴(kuò)增的特異性和準(zhǔn)確性。

產(chǎn)品介紹

本產(chǎn)品采用獨(dú)特的裂解緩沖液體系，能夠快速的從多糖多酚含量高的植物(如：棉花、香蕉等)葉片樣本中釋放出基因組DNA，用于PCR反應(yīng)。裂解緩沖液處理葉片時(shí)，葉片無(wú)需研磨或剪碎處理，因此特別適合大規(guī)?；驒z測(cè)。

裂解緩沖液釋放基因組DNA過(guò)程可以在5-10min內(nèi)完成，不需要其他去蛋白、RNA或者次生代謝產(chǎn)物的過(guò)程，即可將釋放出的微量DNA作為模板進(jìn)行PCR反應(yīng)。

2× Leaf PCR EasyTM Mix具有很強(qiáng)的PCR反應(yīng)抑制物耐受性，能直接以植物材料的裂解產(chǎn)物為模板，進(jìn)行高效特異性擴(kuò)增。該試劑包含公司專門(mén)針對(duì)直接PCR反應(yīng)改造的D-Taq DNA Polymerase、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑和穩(wěn)定劑。與直接裂解液配合使用能夠快速簡(jiǎn)便地對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)，并具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。

2× Leaf PCR EasyTM Mix(UNG)在2× Leaf PCR Mix的基礎(chǔ)上用dUTP替代了dTTP，并同時(shí)加入能夠降解含有dUTP模板的UNG酶(racil-N-glycosylase)。在PCR反應(yīng)前，利用UNG酶降解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物，UNG酶對(duì)不含有尿嘧啶的模板不會(huì)造成任何影響，從而保證擴(kuò)增的特異性和準(zhǔn)確性，防止了大規(guī)模基因檢測(cè)時(shí)可能出現(xiàn)的PCR產(chǎn)物污染問(wèn)題。

D-Taq DNA polymerase是為直接PCR反應(yīng)專門(mén)研制出的DNA polymerase。D-Taq DNA polymerase對(duì)多種PCR反應(yīng)抑制劑具有極強(qiáng)的的耐受性、在各種復(fù)雜反應(yīng)體系中均能高效擴(kuò)增痕量的DNA，擴(kuò)增速度可達(dá)2Kb/min，特別適合進(jìn)行直接PCR反應(yīng)。

根據(jù)植物樣本差異，該產(chǎn)品分為兩個(gè)大類：植物直接PCR試劑盒(Plant Leaf Direct PCR Kit)和多糖多酚植物直接PCR試劑盒(Plant LeafDirect PCR Plus Kit)；在PCR檢測(cè)階段，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，選用普通的2× Leaf PCR EasyTM Mix或是具有防PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染作用的2× Leaf PCR EasyTM Mix(UNG)。

試劑盒應(yīng)用

適用范圍：多種植物葉片。

樣本裂解釋放的DNA：僅用作PCR模板。

試劑盒可用于以下用途：轉(zhuǎn)基因植株鑒定、植物基因分型等。

試劑盒局限性

擴(kuò)增片段≤1kb；超過(guò)1kb，擴(kuò)增效率下降或者擴(kuò)增失敗。

UNG防PCR產(chǎn)物污染體系得到的PCR產(chǎn)物請(qǐng)勿用于基因克隆或測(cè)序。

PCR產(chǎn)物3’末端隨機(jī)加A尾。

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