植物種子(大型)直接PCR試劑盒-防PCR產(chǎn)物污染體系

 產(chǎn)品簡介

直接使用種子裂解液作為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，無需單獨抽提DNA，快速，靈敏度高，適合快速大規(guī)?；驒z測。

增加了UNG防污染體系，杜絕假陽性；試劑盒包含裂解液/PCR Mix

產(chǎn)品特點

無需進(jìn)行費時而昂貴的DNA純化。

樣品需求量小，只需取單粒種子即可。

無需研磨、破碎等特殊處理，操作簡便。

優(yōu)化的PCR體系，使PCR具有更高的特異性、更強(qiáng)的PCR反應(yīng)抑制物耐受性。

防污染PCR體系2× Seed PCR EasyTM Mix(UNG)，有效消除由PCR產(chǎn)物所引起的污染，保證擴(kuò)增的特異性和準(zhǔn)確性。

產(chǎn)品介紹

本產(chǎn)品采用獨特的裂解反應(yīng)體系，能夠快速的從多糖多酚含量低的植物種子樣本(如：水稻、小麥、煙草、玉米、大豆等)中釋放出基因組DNA，用于PCR反應(yīng)，因此特別適合大規(guī)?；驒z測。為了滿足不同檢測試驗的需要，本試劑盒可以使用多種類型的樣本(如完整種子、微量組織切塊或多顆種子的磨碎樣本)進(jìn)行實驗。其中，對于還需要進(jìn)行萌發(fā)的種子樣本，可以選擇切取種胚以外的微量組織切塊(1-5mg)進(jìn)行實驗；對于需要在大量樣本中進(jìn)行抽樣檢測的實驗，可以選擇將多個樣本混合并磨碎成直徑0.5mm左右的顆粒后再進(jìn)行實驗(最低可以檢測出0.1%的目的樣本)。

裂解反應(yīng)體系釋放基因組DNA過程可以在5-10min內(nèi)完成，不需要其他去蛋白、RNA或者次生代謝產(chǎn)物的過程，即可將釋放出的微量DNA作為模板進(jìn)行PCR反應(yīng)。

2× Seed PCR EasyTM Mix具有很強(qiáng)的PCR反應(yīng)抑制物耐受性，能直接以植物材料的裂解混合液為模板，進(jìn)行高效特異性擴(kuò)增。該試劑包含公司專門針對直接PCR改造的D-Taq DNA Polymerase、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑和穩(wěn)定劑。與裂解反應(yīng)體系配合使用能夠快速簡便地對樣品進(jìn)行檢測，并具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等特點。

2× Seed PCR EasyTM Mix(UNG)在2× Seed PCR EasyTM Mix的基礎(chǔ)上用dUTP替代了dTTP，并同時加入能夠降解含有dUTP模板的UNG酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR反應(yīng)前，利用UNG酶降解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物，UNG酶對不含有尿嘧啶的模板不會造成任何影響，從而保證擴(kuò)增的特異性和準(zhǔn)確性，防止了大規(guī)?；驒z測時可能出現(xiàn)的PCR產(chǎn)物污染問題。

D-Taq DNA polymerase是Foregene為直接PCR反應(yīng)專門研制出的DNA polymerase。D-Taq DNA polymerase對多種PCR反應(yīng)抑制劑具有極強(qiáng)的的耐受性、在各種復(fù)雜反應(yīng)體系中均能高效擴(kuò)增痕量的DNA，擴(kuò)增速度可達(dá)2Kb/min，特別適合進(jìn)行直接PCR反應(yīng)。

根據(jù)植物樣本差異，該產(chǎn)品分為兩個大類：植物種子直接PCR試劑盒(Plant Seed Direct PCR Kit)和多糖多酚植物種子直接PCR試劑盒(Plant Seed Direct PCR Plus Kit)。在裂解階段，考慮到不同類型的種子或組織材料在裂解過程中試劑用量差異較大，客戶可根據(jù)自己實驗材料的大小選擇相應(yīng)的植物種子(中小型)直接PCR試劑盒或植物種子(大型)直接PCR試劑盒；在PCR檢測階段，客戶也可以根據(jù)實驗需求，選用普通的2× Seed PCR EasyTM Mix或是具有防PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染作用的2× Seed PCR EasyTM Mix(UNG)。

試劑盒應(yīng)用

適用范圍：多種植物葉片。

樣本裂解釋放的DNA：僅用作PCR模板。

試劑盒可用于以下用途：轉(zhuǎn)基因植株鑒定、植物基因分型等。

試劑盒局限性

擴(kuò)增片段≤1kb；超過1kb，擴(kuò)增效率下降或者擴(kuò)增失敗。

UNG防PCR產(chǎn)物污染體系得到的PCR產(chǎn)物請勿用于基因克隆或測序。

PCR產(chǎn)物3’末端隨機(jī)加A尾。

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